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CGRP降鈣素基因相關(guān)肽

更新時間：2023/7/3

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降鈣基因相關(guān)肽放免藥盒操作說明書

CGRP（HY-041） RIA KIT

降鈣素基因相關(guān)肽（Calcitonin gene related peptide CGRP）是近年來在人和哺乳動物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種生物活性物質(zhì)。CGRP廣泛分布于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)以及某些器官組織中，它是目前已知zui強的舒血管物質(zhì)。對各系統(tǒng)特別是心血管系統(tǒng)有著重要的調(diào)節(jié)作用。

CGRP在機體病理條件下的防御和代償意義已受到高度重視。一般認為在正常生理狀態(tài)下，血漿CGRP和內(nèi)皮素（ET）濃度保持相對恒定。因此，測定血漿CGRP對于研究心肌缺血、腦卒中、高血壓、體外循環(huán)、血管再通以及組織移植都具有廣闊的臨床前景。

藥盒組成：（常溫運輸，4℃保存）

1、緩沖液（PBS）1瓶，用時每瓶加蒸餾水至50ml

2、PR分離劑（第二抗體）1瓶：用前充分搖勻

3、CGRP抗體1瓶。 4、¹²⁵I- CGRP 1瓶：

5、CGRP標準品6瓶，濃度為20、60、150、300、600、1200pg/ml。

樣品收集：

1、血漿采集：

取靜脈血3ml ，注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶10ul（含100U/ml以上）的試管中混勻，4℃3000rpm/ min離心10min分離血漿，-20℃保存2個月，-70℃以下保存半年。測定前，使樣本置于室溫或冷水中復融，混勻后，再次4℃3000rpm/ min離心5min，取上清測定。

2、組織樣品的處理：

取出活組織，吸去血跡，稱重，盡快放入1N HAC 1ml略做碾磨，然后在100℃水中煮沸10min，勻漿。4℃3000rpm/ min離心15min，取上清-20℃以下保存，測定時用PBS五倍以上稀釋，以調(diào)節(jié)PH值。每種組織的樣品非特異結(jié)合（U₀）可能有差異，每份標本單獨做一個U₀。取組織的重量一般在100mg左右為好。

測定方法：（非平衡法加樣）

CGRP RIA加液程序（單位： ul ）

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試劑 T NSB S₀ S₁~S₆ 樣品

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緩沖液 —— 300 200 —— ——

標準品 —— —— —— 200 ——

樣品 —— —— —— —— 200

抗體 —— —— 100 100 100

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搖勻4℃ 放24小時

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¹²⁵I- CGRP 100 100 100 100 100

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搖勻4℃ 放24小時

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分離劑 —— 500 500 500 500

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混勻，室溫15分鐘， 3500 轉(zhuǎn)/分 4℃離心20分鐘，吸棄上清液，測定沉淀cpm數(shù)。

注：測定兔標本時，應改用功25% PEG 作分離劑，每管加500ul，NSB、S₀、S₁~S₆管補加正

常人血清100ul/管（或r-球蛋白100 ul/管）；U、U₀管加PBS 100ul/管。

結(jié)果計算：

以N/T、B/T計算NSB、S₀結(jié)合百分率，以B/B₀計算標準及待測樣品結(jié)合百分率，在半對數(shù)坐標紙上繪制標準曲線，并查出樣品值，或由自動r計數(shù)儀預先編制程序。直接給出有關(guān)參數(shù)，標準曲線及樣品濃度。

注意事項：

本月標準品每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月藥盒抗體每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月藥盒標記每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月分離劑在使用前充分混勻（不可冰凍）

本試劑盒主要技術(shù)指標：

1． NSB：5%。

2．靈敏度：<15pg/ml。

3．標準曲線范圍：20~1200pg/ml。

4．批內(nèi)變異系數(shù)：CVw<7.0 %。

5．批間變異系數(shù)：CVw < 12.0% 。

6．特異性：本抗血清與內(nèi)皮素（ET）、胃動素（MTL）、骨鈣素（BGP）、C端甲狀旁腺素（C-PTH）、降鈣素（CT）等多肽均無交叉反應。

7．正常參考值：各實驗室應根據(jù)自己的條件建立自己的正常對照組。

50.6±24.5pg/ml（n=25）。

本次藥盒參考數(shù)據(jù)：

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T NSB S₀ S₁ S₂ S₃ S₄ S₅S₆

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CPM

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N/T% B₀/T% B/ B₀ %

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生產(chǎn)日期：

有效日期：

*FR--034**	AⅡ	200	25－800	過夜
	血管緊張素Ⅱ		（pg/ml）
*FR--035**	Aldosterone	100	0.0625-2	過夜
	醛固酮		（ng/ml）
*FR--036**	ANP	100	0.0625-2	過夜
	心鈉素		（ng/ml）
*FR--037**	β₂-MG	50	0.2－10	37℃
	β₂-微球蛋白		（ug/ml）	1h
	（寬范圍）
*FR--038**	α₁-MG	100	2-80	37℃
	α₁-微球蛋白		（ug/ml）	1h
*FR--039**	TXB₂	200	12.5-400	過夜
	血栓素B₂		（pg/ml）
*FR--040**	6-Keto-PGFla	200	25-1600	過夜
	6-酮		（pg/ml）
*FR--041**	ET	200	20-1000	過夜
	內(nèi)皮素		（pg/ml）
*FR--042**	CGRP	200	15-1200	過夜
	降鈣素基因相關(guān)肽		（pg/ml）
*FR--043**	ACTh	100	5-405	過夜
	促腎上腺皮質(zhì)激素		（pg/ml）

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