更新時間:2021-07-19
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樣品收集、處理及保存方法:
1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,使用不含熱原的試管,收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。
血清跟血漿的本質(zhì)區(qū)別:
A 血 漿:離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后,通過離心沉淀,所獲得的不含細胞成分的液體,即血漿
B 血 清:離體的血液凝固之后,jing血凝塊聚縮釋出的液體,即血清,粗略的說
C 血清與血漿的區(qū)別 = 主要在于血清不含纖維蛋白元
利用交叉實驗辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
R1、取出購買的A的包被板兩條。
R2、一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
R3、另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
R4、后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
R5、實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
R6、小鼠骨成型蛋白受體ⅡBMPR-ⅡELISA試劑盒如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
結(jié)果判斷與分析:
1) 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。
2) 以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的GHR標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的GHR含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3) 檢測值范圍:0-80ng/ml
4) 敏感度: 0.1 ng/ml
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