大鼠ELISA試劑盒運(yùn)用的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化,將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的辦法顯現(xiàn)出來。
固相吸附蛋白對(duì)錯(cuò)特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才華,為了確??乖贵w反應(yīng)的特異性,因而被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)分,被檢測(cè)靶方針中也結(jié)合了酶分子。
大鼠ELISA試劑盒該還具有以下特性:
特異性:大鼠ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的要害組分、抗體對(duì)有關(guān),若抗體對(duì)中為多抗,另一個(gè)有必要為單抗,建議運(yùn)用雙單抗;
簡便性:在保證高質(zhì)量數(shù)據(jù)的情況下,實(shí)驗(yàn)時(shí)間越短,操作越便利,越簡略遭到用戶等候,這也無妨作為選擇試劑盒的一個(gè)方針;
簡易:以簡略的一步反應(yīng)取代慣例法的五個(gè)進(jìn)程;
通用:適合于絕大多數(shù)一級(jí)抗體,并且不需要二級(jí)抗體反應(yīng);
便利:以1個(gè)小時(shí)取代慣例法的3-5個(gè)小時(shí);
活絡(luò):具有與慣例法相似的活絡(luò)度;
重現(xiàn)性好:實(shí)驗(yàn)成果重現(xiàn)性好;
經(jīng)濟(jì):抗體和試劑可重復(fù)運(yùn)用4-5次。
結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促進(jìn)底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測(cè)人員可以裸眼查詢,可以通過顏色來斷定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判別標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在恰當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
將抗原抗體反應(yīng)固相化,即實(shí)驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不損壞蛋白分子結(jié)構(gòu),堅(jiān)持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性。
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