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原代細胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng)，是建立細胞系的步，其步驟包含選材→分別→培養(yǎng)和維持，今天給大家?guī)碓毎囵B(yǎng)的一些技巧，希望大家能有所收獲！

原代細胞培養(yǎng)的使用
1.為研討生物體細胞的生長、代謝、繁衍供應(yīng)有力的手法；

2.為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件；

3.服務(wù)于臨床實踐，用于藥物篩選等。

原代細胞培養(yǎng)之分別注意事項

一、組織塊培養(yǎng)法

1.組織塊接種后的前3天，在觀察和移動的進程中，注意不要引起液體的振蕩。要避免常常翻動和振蕩，不然組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會墜落飄起。

2.參加的培養(yǎng)液不宜過多，避免浸泡的組織塊受細微的不堅定而墜落下來。

3.當(dāng)細胞向外遷徙出來后要注意記載并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞，它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細胞的生長。

4.為促進組織塊從速粘貼在培養(yǎng)瓶皿上，能夠在栽培前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。

二、貼壁型原代細胞

1.原代培養(yǎng)的分別細胞在初度觸摸體外環(huán)境時，它們之間會互相影響，在這些細胞之間能產(chǎn)生一些促生長的活性物質(zhì)，使細胞彼此互相促進存活和生長。假如接種的細胞密度過低，細胞之間的促生長作用很小，也很難使細胞習(xí)慣從體內(nèi)的組織環(huán)境到被渙散后進入獨立生存環(huán)境的改變進程。假如接種的細胞密度過大，會導(dǎo)致營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)缺少，代謝廢物堆集較快需求常常換液和傳代。
2.恰當(dāng)增大原代培養(yǎng)接種的細胞密度，給培養(yǎng)的細胞供應(yīng)更多的類似于在體內(nèi)時細胞之間的相互作用，會極大進步原代培養(yǎng)的細胞在體外存活率。待細胞習(xí)慣體外環(huán)境后進行傳代培養(yǎng)時再以較低的密度接種和培養(yǎng)。
3.從速使接種的細胞貼壁，是決議培養(yǎng)能否成功的要害。能夠在接種后先將培養(yǎng)瓶置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)3h到5h，待細胞貼壁后，再補足培養(yǎng)液持續(xù)培養(yǎng)。

三、懸浮型原代細胞

1.有必要堅持細胞的懸浮狀況。能夠通過添加培養(yǎng)液的黏度來幫助細胞呈懸浮狀況，如給培養(yǎng)液中參加低濃度的透明質(zhì)酸復(fù)合物。在有攪拌設(shè)備的培養(yǎng)器皿內(nèi)參加培養(yǎng)液，以5ml為低限度，不然攪拌時會產(chǎn)生氣泡對細胞形成損害。運用這種方法需注意勿使攪拌速度過快，不然即可使培養(yǎng)液溢出又簡單形成污染。假如培養(yǎng)液的量在5ml以下，能夠選用旋轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)。給懸浮培養(yǎng)的細胞換液時要注意不要吸出細胞。
 2.能夠進行懸浮培養(yǎng)的細胞，其生命力一般都比較旺盛，體外分裂增殖的速度較快，營養(yǎng)成分消耗大，換液時間隔一般較短。