血清是一種成分復(fù)雜的混合物,且對細(xì)胞成長具有促進作用,我們培育細(xì)胞離不開血清。那在大規(guī)模細(xì)胞培育中由血清引起的細(xì)胞成長狀況不佳及病毒滴度的影響都有哪些體現(xiàn)?
一、細(xì)胞成長速度緩慢,長滿單層時刻長;從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,用同一種培育液,別離加入10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培育72小時,會呈現(xiàn)對照血清長滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不合適用來大規(guī)模培育細(xì)胞。
二、細(xì)胞傳代后形狀不正常,細(xì)胞狀況發(fā)生變化 ;因為血清的質(zhì)量問題,使本來狀況正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形狀會變差;
比方:細(xì)胞瓶里會呈現(xiàn)一些活動的小黑點(并非污染),或許細(xì)胞表面形成一層油狀掩蓋物;細(xì)胞的概括變得模糊,細(xì)胞之間的空隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細(xì)胞向四周擴展成長。
三、細(xì)胞傳幾代后就呈現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代 ;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子,會使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的才能。細(xì)胞會從正常的貼壁狀況,邊緣開端縮小,上翹。觀察到的現(xiàn)象便是細(xì)胞表面不光滑,晃動細(xì)胞瓶會看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培育液動搖。跟著傳代次數(shù)添加,細(xì)胞縮小的狀況越來越嚴(yán)峻,直到終*脫壁而死亡。
四、細(xì)胞長的很好,細(xì)密的單層,狀況也很正常,但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測簡直測不出抗原滴度。這種狀況也許是因為 血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。
五、細(xì)胞成長的狀況一般,產(chǎn)毒少,毒價低。這種狀況比較常見,細(xì)胞是病毒的載體,因為血清質(zhì)量欠好,導(dǎo)致細(xì)胞成長狀況欠好,病毒就無法進行正常的仿制。并非病毒都不能仿制,所以就形成疫苗的效價不行,可能形成不合格產(chǎn)品。
比方血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,如果存在這些抗體,就會把接進去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,病毒會被抗體*中和,就沒病毒顆粒在細(xì)胞中增殖,所以會檢測不到病毒滴度。
這種狀況給疫苗企業(yè)形成的損失是相當(dāng)大的,不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多作業(yè)悉數(shù)白費,糟ta人力、物力,尤其是時刻上的糟ta,從培育細(xì)胞開端到接病毒,到收液至少需求一兩個月,一旦呈現(xiàn)不產(chǎn)毒的狀況,那么這一兩月時刻就白白糟ta掉了,這也是牛血清給疫苗企業(yè)形成的風(fēng)險之一。
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