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通蔚技術(shù)交流: 新技能get!肺炎支原體lgM檢測
更新時(shí)間:2018-03-09   點(diǎn)擊次數(shù):1708次

肺炎支原體lgM檢測
特異性】該試劑盒與下列因素不發(fā)生交叉反應(yīng):腺病毒、風(fēng)濕因子、呼吸道合胞病毒、抗核抗體、流感病毒A型和B型、副流感病毒3型、組織胞漿菌、巨細(xì)胞病毒等。
【原理】 肺炎支原體快速檢測卡可檢測血清中的肺炎支原體lgM抗體?;颊叩难鍢悠贩謩e加入兩個(gè)測試孔內(nèi),當(dāng)樣品沿膜擴(kuò)散時(shí),分別加入3滴抗人lgM堿性磷酸酶復(fù)合物、3滴洗液和2滴底物,5分鐘后觀察結(jié)果。質(zhì)控孔為質(zhì)量控制,固定有人lgM,測試孔固定有肺炎支原體抗原。陽性反應(yīng)結(jié)果為藍(lán)色,陰性結(jié)果為無色。
【樣本處理】血清樣品2—8℃可保存3天,如果不能在此期間測試,-20℃保存,樣品不宜反復(fù)凍融。
肺炎支原體lgM操作
1、從冰箱中取出試劑盒,置室溫平衡20分鐘。
2、從錫紙袋中取出檢測卡,作好標(biāo)記。
3、用移液管滴加2滴血清到卡下端兩個(gè)測試孔中。
4、22—25℃下孵育2分鐘。2分鐘內(nèi)血清應(yīng)沿膜擴(kuò)散至上端的測試孔中。
5、加入3滴酶結(jié)合物到下端兩個(gè)測試孔中,22—25℃下孵育2分鐘,酶結(jié)合物應(yīng)沿膜擴(kuò)散至上端的測試孔中。
6、加入3滴洗液到上端兩個(gè)測試孔中,等待*吸收。
7、滴加2滴底物試劑到上端兩個(gè)測試孔,22—25℃下孵育5分鐘,5分鐘后立即觀察反應(yīng)結(jié)果。
材料
1、患者血清。
2、肺炎支原體lgM檢測試劑盒,包括:
(1)檢測卡:單獨(dú)錫紙包裝,卡上固定有肺炎支原體抗原或人lgM(質(zhì)控孔)。
(2)陽性質(zhì)控液(1.7ml):含有人抗肺炎支原體lgM的0.1%疊氮鈉緩沖液。
(3)陰性質(zhì)控液(1.7ml):0.1%疊氮鈉緩沖液。
(4)酶結(jié)合物:(11ml):含有以堿性磷酸酶標(biāo)記的抗人lgM單克隆抗體的0.1%疊氮鈉緩沖液。
(5)洗液:9.5%(W/V)的呱基氫氯酸。
(6)底物(15ml):含有5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸的0.1%疊氮鈉的緩沖液。
(7)移液管。
【肺炎支原體lgM結(jié)果】 
根據(jù)上端兩個(gè)反應(yīng)孔的反應(yīng)結(jié)果判斷:
陽性結(jié)果:上端兩孔都出現(xiàn)藍(lán)色。提示肺炎支原體性lgM存在。
陰性結(jié)果:質(zhì)控孔出現(xiàn)藍(lán)色或輕微藍(lán)色,測試孔無色或呈暗灰色,提示不存在肺炎支原體lgM或其濃度在檢測下限之下。
無效反應(yīng):質(zhì)控孔不出現(xiàn)藍(lán)色。產(chǎn)生無效反應(yīng)的可能原因?yàn)椋涸噭┗驒z測卡質(zhì)量問題,操作不當(dāng),樣品擴(kuò)散不好,酶結(jié)合物嚴(yán)重污染,血清中含有過多脂質(zhì)成分等。無污染血清可離心后再次測試 。
    

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