ELISA試劑盒影響反響因素較多，特別是固相載體的包被難到達各個別之間的共同，因此在定量測定中，每批測驗均須用一系列不一樣濃度的參閱規(guī)范品在一樣的條件下制作規(guī)范曲線。
測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA試劑盒，規(guī)范曲線的規(guī)模通常較寬，曲線zui高點的吸光度可接近2.0，繪制時常用半對數(shù)紙，以檢查物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點銜接，所得曲線通常呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中心較呈直線的有些是的檢查區(qū)域。在實驗條件(包含試劑)較難確保穩(wěn)定的情況下，這種判別法較為適宜。
ELISA試劑盒在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后，核算S/N值。也有寫作P/N的，這兒的P不代表陽性ELISA試劑盒(positive)，而是患者(patient)的縮寫，不該誤解。為防止混雜，更宜用S/N表明。在前期的間接法ELISA中，有些作者定出S/N為陽性規(guī)范，現(xiàn)多為各種測定所沿襲。實際上每一測定體系應(yīng)該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)留意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。
有的ELISA試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液，致使反響后發(fā)生的本底也許較正常人血清的本底低得多。定性測定的成果判別是對受檢標本中是不是含有待測抗原或抗 出"有"或"無"的簡略答復(fù)，分別用"陽性"、"陰性"表明。"陽性"表明該標本在該測定體系中有反響。"陰性"則為無反響。用定性判別法也可得到半定量成果，即用滴度來表明反響的強度，其實質(zhì)仍是一個定性實驗。在這種半定量測定中，將標本作一系列稀釋后進行實驗，呈陽性反響的zui高稀釋度即為滴度。依據(jù)滴度的高低，能夠判別標本反響性的強弱，這比調(diào)查不稀釋標本呈色的深淺判別為強陽性、弱陽性更具定量意義。 在間接法和夾心法ELISA試劑盒中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA試劑盒中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反響的成果判別方法不一樣，分述于下。
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