先用肉湯培養(yǎng)基復(fù)活,此為菌種*代;從營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物中挑菌液劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第二代;一個月后,從斜面上挑菌劃相應(yīng)的選擇性培養(yǎng)基平板,選擇典型菌落,接種于營養(yǎng)瓊脂斜面,此為菌種第三代;依次下去,直至第五代,就可以不再接了,可以買新的菌種了。
1.選擇復(fù)活用的培養(yǎng)基,可選用說明書中推薦的培養(yǎng)基,根據(jù)菌株的分類進(jìn)行選擇,請說明購買菌株的類型或名稱;
2.選擇菌株保存的方法:冷凍真空干燥保藏法(可保存10年以上,需真空冷凍干燥機(jī)等設(shè)備)、超低溫保藏(可保存兩年左右,但需有-80℃冰箱)、定期移植保藏法(可保存1-6月) ,請根據(jù)實際情況進(jìn)行選擇;
3.準(zhǔn)備需要的培養(yǎng)基、保存管、甘油、尖頭吸管(有時常規(guī)吸管太粗,無法深入菌種管底部)、開啟工具等;
4.無菌開啟菌種管,將管內(nèi)干粉溶解轉(zhuǎn)入相關(guān)培養(yǎng)基,培養(yǎng)后選擇保存菌種的代數(shù);
5.進(jìn)行驗證實驗(革蘭氏染色、菌落形態(tài)、生化試驗、血清試驗或其他鑒定系統(tǒng)等),確認(rèn)后保存菌種,注意整個過程的無菌操作。
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