影響抗原抗體反應的因素有兩方面,一是反應物自身的因素;二是反應環(huán)境條件。
(一)反應物自身的因素
1.抗體:不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑。等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應。
2.抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應結(jié)果。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應,可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應,單價抗原與相應抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。
?。ǘ┓磻h(huán)境條件
1.電解質(zhì):抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應。為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。
2.酸堿度:抗原抗體反應必須在合適的pH環(huán)境中進行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點。抗原抗體反應一般在pH6~9進行,有補體參與的反應pH為7.2~7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應。
3.溫度:在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速。一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞。每種試驗都有其*的zui適反應溫度要求。此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應。
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